X 射線三維顯微鏡是一種強大的微觀結(jié)構(gòu)分析工具,在材料科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等眾多領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。由于其成像原理基于 X 射線與樣本的相互作用,所以對樣本制備有一些特殊要求。
一、厚度要求
材料樣本:對于材料科學(xué)研究中的金屬、陶瓷等樣本,其厚度需要根據(jù)材料的密度和 X 射線的穿透能力來確定。一般來說,較厚的高密度材料可能會吸收過多的 X 射線,導(dǎo)致成像效果不佳。例如,在研究金屬合金的微觀結(jié)構(gòu)時,如果樣本過厚,X 射線可能無法穿透,無法獲取內(nèi)部完整的三維信息。理想情況下,樣本厚度應(yīng)盡量控制在 X 射線能夠有效穿透的范圍內(nèi),這個范圍可能因不同的 X 射線能量和材料特性而有所不同。
生物樣本:生物樣本通常比較柔軟且含水量高。對于細胞或組織樣本,厚度也不能過大。因為生物組織中的水和有機成分對 X 射線的吸收和散射情況復(fù)雜,過厚的樣本會增加成像的模糊性。例如,在觀察腦組織切片時,厚度一般要控制在幾百微米以內(nèi),這樣才能保證 X 射線能夠較好地穿透,清晰地顯示細胞的三維結(jié)構(gòu)。
二、固定與穩(wěn)定要求
材料樣本:為了確保在成像過程中樣本的位置和形態(tài)不發(fā)生改變,材料樣本需要被牢固地固定。尤其是對于一些粉末狀或者顆粒狀的材料,需要采用合適的粘結(jié)劑或者固定裝置,將它們固定在載物臺上。例如,在研究納米材料顆粒的三維分布時,要使用特殊的膠水將納米顆粒固定在基底材料上,防止其在成像過程中移動,影響成像的準確性。
生物樣本:生物樣本需要進行適當(dāng)?shù)墓潭ㄌ幚?,以保持其細胞結(jié)構(gòu)和形態(tài)。通常采用化學(xué)固定劑,如甲醛等,使細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)等成分凝固,防止細胞在成像過程中發(fā)生自溶或者形態(tài)變化。同時,在成像過程中,還需要保證樣本處于合適的溫度和濕度環(huán)境,避免樣本因干燥或者溫度變化而變形。
三、成分要求
避免干擾成分:樣本中的某些成分可能會對 X 射線產(chǎn)生強烈的吸收或者散射,干擾成像。例如,在研究一些復(fù)合材料時,如果其中含有大量的重金屬元素,這些元素可能會掩蓋其他成分的信息。在這種情況下,需要對樣本進行預(yù)處理,盡可能減少干擾成分的影響,或者采用特殊的成像方法來區(qū)分不同成分的信號。
標記要求:在生物醫(yī)學(xué)研究中,為了更清楚地觀察特定的細胞結(jié)構(gòu)或者生物分子,有時需要對樣本進行標記。標記物應(yīng)該選擇對 X 射線有適當(dāng)吸收或散射特性的物質(zhì),并且標記過程不能影響樣本的原有結(jié)構(gòu)和功能。比如,使用含有金納米顆粒的標記物來標記特定的蛋白質(zhì),金納米顆??梢栽鰪?X 射線的散射信號,從而更清晰地顯示目標蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的位置和分布。